您所在位置: 首页 > 期刊 > 过刊浏览 > 医药科学综合> 《中华医学研究杂志》> 2012年11月12卷11期>药物与临床> 文章详情

HPLC法测定感冒退热胶囊中绿原酸的含量

首席医学网      2012年10月17日 21:27:56 Wednesday  
 
  加入收藏夹

作者:吕情花,姚敏    作者单位:417000 湖南娄底,娄底市食品药品检验检测所

【摘要】  目的建立HPLC法测定感冒退热胶囊中绿原酸的含量。方法采用Gemini -C18柱(200mm×4.60mm, 5μm),流动相为乙腈-0.3%磷酸(17:83),流速为1.00ml/min,检测波长327nm,柱温为30℃。结果绿原酸进样量在0.0712~0.8902μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0.9993(n=5),平均回收率为99.5%,RSD=1.7%(n=6)。结论该方法简便、准确、可靠、重现性好,可用于该制剂的质量控制。

【关键词】  感冒退热胶囊;绿原酸;HPLC;含量测定

  感冒退热胶囊由金银花、板蓝根、连翘等六味药组成,具有清热解毒等功效。用于感冒发热、上呼吸道感染等。绿原酸是金银花有效成分之一。本品现标准中尚无含量测定项目,为有效控制感冒退热胶囊内在质量,本文选用绿原酸作为含量测定指标并加以控制,建立感冒退热胶囊中绿原酸HPLC含量测定方法,结果表明该方法准确,可靠,重复性好,可用于本品的质量控制。

  1仪器与试药

  岛津LC-20AT系列高效液相色谱仪(日本岛津), AUW220D电子天平。绿原酸对照品(中国药品生物制品检定所,含量测定用,批号110753-200413);感冒退热胶囊(邵东中医医院提供,批号120423 120512 120419);乙腈为色谱纯,自制纯化水,其他试剂均为分析纯。

  2方法与结果

  2.1色谱条件色谱柱:Gemini- C18柱(200mm×4.60mm,5μm);流动相:乙腈-0.3%磷酸(17:83);流速:1.00ml/min;检测波长:327nm; 柱温:30℃;进样量:10.00μl。

  2.2对照品溶液的制备称取绿原酸对照品11.87mg,置50ml棕色量瓶中,加50%甲醇溶解稀释至刻度,摇匀,即得储备液(237.4μg/ml)。精密量取储备液15ml,置100ml棕色量瓶中加50%甲醇稀释至刻度,即得(每1ml含绿原酸35.61μg)。

  2.3供试品溶液的制备精密称取本品0.5g,置50ml棕色量瓶中,加50%甲醇超声处理30min,放冷,加50%甲醇至刻度,摇匀,即得。

  2.4阴性对照溶液的制备按处方配比(缺金银花药材)照工艺制备成模拟口服液,按“2.3”项下的方法制成阴性对照溶液。

  2.5干扰试验 照上述色谱条件,取上述三种溶液各10μl,分别进样,色谱图见图1。供试品色谱图中,在与对照品色谱图相应的保留时间处,有相同的色谱峰,而阴性对照溶液无干扰峰。

  2.6线性关系考察将上述绿原酸对照品溶液,分别进样2.0μl,5.0μl,10.0μl,15.0μl,25.0μl,以平均峰面积为纵坐标,以进样量为横坐标,进行线性回归,得方程:Y=2.63×106X+3295,r=0.9993,线性范围为0.0712~0.8902μg。

  2.7精密度试验取对照品溶液连续进样6次,每次10μl,记录峰面积, RSD为0.6%,表明精密度良好。

  2.8稳定性试验取供试品溶液(批号120423),分别于0、4、8、12、24h进样10μl,测得样品中绿原酸峰面积的RSD为1.5%,表明供试品溶液在24h内稳定。

  2.9重复性试验精密取同一批号样品(批号120423)6份,按“2.3”项下的方法制备供试品溶液,依法测定,结果绿原酸含量的RSD为1.2%,表明本法重复性较好。

  图1HPLC色谱图2.10加样回收率试验量取已知绿原酸含量的样品6份(批号为120423),每份0.25g,分别加入绿原酸对照品储备液(237.4μg/ml)350μl,按“2.3”项下的方法制备供试品溶液,计算回收率,结果见表1。表1加样回收率试验(n=6)

  2.11样品含量测定取3批样品, 按“2.3”项下的方法制备供试品溶液,进样10μl,照外标法(峰面积)计算绿原酸的含量,测定结果分别为:批号120423,含量为0.3260mg/g批号120512,含量为0.3342mg/g批号120419,含量为0.3309mg/g。

  3讨论

  考察了乙腈-1%冰醋酸、乙腈-0.4%磷酸[1]等流动相,最终确定乙腈-0.3%磷酸(17:83)作为流动相,流速为1.0ml/min,分离效果良好,分析快速准确,重复性好,回收率高。

【参考文献】
    1国家药典编委会.中国药典,一部.北京:化学工业出版社,2010:205-206.

  订阅登记:

请您在下面输入常用的Email地址、职业以便我们定期通过邮箱发送给您最新的相关医学信息,感谢您浏览首席医学网!

邮箱:    专业:    职称:      

医学期刊医学会议医学专区医学护理