您所在位置: 首页 > 期刊 > 过刊浏览 > 医药科学综合> 《吉林医学》> 2012年2月33卷4期>实验研究> 文章详情

白藜芦醇对兔动脉粥样硬化肢体缺血再灌注损伤的影响

首席医学网      2012年07月21日 11:54:18 Saturday  
 
  加入收藏夹   官方投稿信息

作者:陈平安1,李韶南1,段建军2    作者单位:(1.广州医学院附属广州市第一人民医院心内科,广东 广州 510182;2.广州医学院,广东 广州 510182)

【摘要】  目的:探讨白藜芦醇对兔动脉粥样硬化肢体缺血再灌注损伤的影响,评价其对兔肢体缺血再灌注损伤的保护作用。方法:新西兰白兔12只,高脂饮食后随机分为假手术组,缺血再灌注损伤组,白藜芦醇治疗组。缺血再灌注损伤组微血管夹夹闭股动脉5 h后恢复血流,白藜芦醇治疗组予10 mg/(kg·d)剂量治疗。观察不同组间血清磷酸肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH),血清和后肢肌肉中丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD)的差别。结果:与缺血再灌注损伤组相比,白藜芦醇治疗组术后第7天、第14天CK、LDH降低,SOD升高(P<0.05)。术后第7天MDA较缺血再灌注损伤组降低(P<0.05)。结论:白藜芦醇能改善兔后肢缺血再灌注损伤后的部分血清学指标,减轻缺血再灌注时肌细胞损伤的程度。

【关键词】  白藜芦醇; 缺血再灌注损伤; 肢体

  Abstract:ObjectiveTo investigate the effects of resveratrol on ischemia-reperfusion injury in limbs of atherosclerosis in rabbits,and to assess the protection of resveratrol for ischemia-reperfusion injury.MethodAfter high-fat diet,twelve healthy rabbits were divided into sham operation group,resveratrol group and ischemia-reperfusion injury group. Resveratrol [10 mg/(kg·d)]was injected,5 h later ischemia followed by reperfusion in resveratrol group and no resveratrol was used in ischemia-reperfusion injury group. The contents of CK,LDH,MDA and SOD in the serum and MDA,SOD in the muscle were measured respectively and the difference was studied. ResultsCK,LDH in the serum were significantly lower and SOD was significantly higher in ischemia-reperfusion injury group than that in resveratrol group (P<0.05).ConclusionResveratrol can reduce the extent of damage caused by ischemia-reperfusion injury.

  Key Words:Resveratrol;Ischemia-reperfusion injury;Limb

  介入或外科手术为下肢动脉粥样硬化性疾病重要的治疗措施之一,但术后下肢缺血再灌注损伤仍是困扰临床的难题。白藜芦醇属于酚类植物抗毒素,具有抗氧化、清除自由基等多种药理学作用[1]。其能通过促进血管生成[2]等多种途径减轻心肌细胞缺血再灌注损伤。本研究旨在探讨白藜芦醇对兔肢体缺血再灌注损伤的影响。

  1 资料与方法

  1.1 对象和分组:取健康成年新西兰白兔12只,雌雄不限,体重2.0~2.6 kg,随机分为假手术组(PS组,4只),缺血再灌注损伤组(IR组,4只),白藜芦醇治疗组(RT组,4只)。实验动物购于广东省医学实验动物中心。

  1.2 动物模型制备和标本采集:高脂饲料(0.5%胆固醇+5%猪油+10%蛋黄粉+85%普通饲料)喂养白兔2周后,参照Wei X等[3]的方法20%戊巴比妥钠(25 mg/kg)经耳缘静脉麻醉动物,将动物固定后右腹股沟及右后肢处剪毛、消毒,于股三角处沿股动脉走行方向切开皮肤、皮下组织,分离股血管鞘,游离股动脉。微血管夹夹闭股动脉,同时从股血管鞘下方用橡皮止血带环扎后肢阻断侧枝循环造成肢体缺血,5 h后松开血管夹和橡皮止血带,缝合切口和皮肤,术后予青霉素(2万U/kg)肌内注射治疗3 d,继续高脂饲料喂养。假手术组仅游离出股动脉不予夹闭,白藜芦醇治疗组以10 mg/(kg·d)剂量耳缘静脉推注14 d,缺血再灌注损伤组术后予等量生理盐水耳缘静脉推注。分别于术后第7、第14天抽取三组动物对侧耳缘静脉静脉血3 ml,静置离心后备检。术后第14天静脉取血后将动物深麻醉处死,取右后肢腓肠肌,去除脂肪,制备成组织匀浆,离心后取上清液备检。

  1.3 生化指标检测:血清CK、LDH采用OLYMPUS全自动生化分析仪AU2700测定,MDA和SOD分别采用硫代巴比妥酸法和黄嘌呤氧化酶法测定。免疫细胞化学染色,检测肌肉内MDA、SOD含量。试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。

  1.4 统计学处理:全部数据采用SPSS 16.0统计软件进行处理。计量资料采用均数±标准差(x±s)表示;多组均数间比较用单因素方差分析,两两比较用SNK-q检验。P<0.05为差异有统计学意义。

  2 结果

  2.1 肢体功能观察:PS组3只术后第3天恢复正常行走,1只术后第4天恢复正常行走。IR组和RT组均有不同程度跛行。

  2.2 不同时间点血清酶学的比较:IR组和RT组术后第7天、第14天CK、LDH、MDA比PS组高,SOD较PS组低(P<0.05)。与IR组相比,RT组术后第7天、第14天CK、LDH降低,SOD升高(P<0.05)。RT组术后第7天的MDA较缺血再灌注损伤组降低(P<0.05),而术后第14天的MDA无明显降低(P=0.051),见表1。表1 组间动物不同时间血清CK、LDH、MDA、SOD值比较

  2.3 腓肠肌中MDA、SOD值的比较:与PS组相比,IR组和RT组右后肢腓肠肌中MDA含量升高,SOD含量下降(P<0.05)。而IR组和RT组MDA、SOD值间均无统计学差异(P>0.05)。见表2。表2 组间动物腓肠肌MDA、SOD值比较

  3 讨论

  肢体缺血再灌注损伤可引起组织水肿、筋膜间隔综合症,严重者影响肢体功能的恢复。MDA为脂质过氧化产物,其含量的高低表明脂质过氧化反应的程度,SOD能清除缺血再灌注损伤时产生的超氧化物阴离子,二者都能间接反应肌细胞损伤的程度。

  白藜芦醇具有抗氧化、清除自由基等多种药理学作用[1]。Bak I等认为无论在有无充足能量供应的情况下,其能通过减少内皮素生成和心肌细胞凋亡,促进血管生成[2]等多种途径减轻心肌缺血再灌注损伤。国内张利萍[4],沈敏[5]等亦有有关白藜芦醇减轻缺血心肌再灌注损伤的报道。

  本研究显示IR组和RT组术后第7天、第14天血清CK、LDH、MDA比PS组高,SOD较PS组低(P<0.05),表明缺血再灌注通过脂质过氧化反应等途径引起肌细胞损伤。与IR组相比,RT组术后第7天、第14天CK、LDH降低,SOD升高,术后第7天的MDA下降,表明RT组肌细胞损伤程度、自由基的作用及脂质过氧化反应都弱于IR组,显示白藜芦醇能减轻兔后肢缺血再灌注损伤。可能与缺血再灌注损伤时白藜芦醇起到自由基清除剂的作用,能使细胞膜的脂质过氧化反应及氧自由基对DNA的损伤作用减弱[6],增加内源性抗氧化酶活性,抑制活性氧[7]及降低血脂[8]等作用有关。术后第14天RT组血清MDA较IR组有下降趋势,但差异无统计学意义(P=0.051),可能与脂质过氧化反应随着正常血流恢复时间的延长而逐渐减弱,在脂质过氧化反应不太强烈的情况下白藜芦醇对其影响较小有关。

  白藜芦醇能影响细胞增殖、分化、线粒体能量代谢[9]。肌肉组织中的MDA和SOD含量也能间接反应肌细胞损伤的程度。与PS组相比,IR组和RT组右后肢腓肠肌中MDA含量升高,SOD含量下降(P<0.05)。与IR组相比RT组兔后肢MDA有下降趋势、SOD值有上升趋势,但均无统计学差异(P>0.05)。而Elmami N等[10]的研究显示缺血再灌注数小时后大鼠胫前肌中白藜芦醇治疗组MDA水平明显下降,推测可能与本研究观察时间偏长、白藜芦醇使用剂量和样本量偏小等因素有关。

  本研究显示白藜芦醇能降低兔后肢缺血再灌注损伤时血清CK、LDH浓度,升高SOD浓度,减轻缺血再灌注时肌细胞损伤的程度。但白藜芦醇与骨骼肌组织中各种缺血再灌注损伤指标关系及对肢体功能的长期影响如何有待进一步研究。

【参考文献】
    [1] 郝捍东,何立人.白藜芦醇抗心血管疾病作用研究进展[J].国外医学心血管疾病分册,2003,30(5):300.

  [2] Fukuda S,Kaga S,Zhan L,et al. Resveratrol ameliorates myocardial damage by inducing vascular endothelial growth factor-angiogenesis and tyrosine kinase receptor Flk-1[J]. Cell Biochem Biophys,2006,44(1):43.

  [3] Wei X,Zhang Z,Han I,et al. Protective effect of anisodamine on reperfusion injury of skeletal muscles in rabbit[J]. Acta Orthop Scand,1998,69(6):633.

  [4] Zhang LP,Yang CY,Wang YP,et al. Protective effect of polydatin against ischemia/reperfusion injury in rat heart[J]. Acta Physiologica Sinica,2008,60(2):161.

  [5] 沈 敏,刘 兵,张庆荣,等. 白藜芦醇预处理对心肌细胞缺血/再灌注损伤保护作用的机制研究[J].中国实用医药,2008,3(3):7.

  [6] Ozkan OV,Yuzbasioglu MF,Ciralik H,et al. Resveratrol,a natural antioxidant,attenuates intestinal ischemia/reperfusion injury in rats[J]. Tohoku J Exp Med,2009,218(3):251.

  [7] Gedik E,Girgin S,Ozturk H,et al. Resveratrol attenuates oxidative stress and histological alterations induced by liver ischemia/reperfusion in rats[J]. World J Gastroenterol,2008,14(46):7101.

  [8] Juhasz B,Das DK,Kertesz A,et al. Reduction of blood cholesterol and ischemic injury in the hypercholesteromic rabbits with modified resveratrol,longevinex[J]. Mol Cell Biochem,2011,384(1):199.

  [9] Borriello A,Cucciolla V,Della Ragione F,et al. Dietary polyphenols:focus on resveratrol,a promising agent in the prevention of cardiovascular diseases and control of glucose homeostasis[J]. Nutr Metab Cardiovasc Dis,2010,20(8):618.

  [10] Elmami N,Esenkaya L,karadag N,et al. Effects of resveratrol on skeletal muscle in ischemia-reperfusion injury[J]. Ulus Travma Acil Cerrahi Derq,2007,13(4):274.

  [编校:王丽娜/郑英善]

  订阅登记:

请您在下面输入常用的Email地址、职业以便我们定期通过邮箱发送给您最新的相关医学信息,感谢您浏览首席医学网!

邮箱:    专业:    职称:      

医学期刊医学会议医学专区医学护理