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前列腺素合成酶在肾及胃分布的探讨

首席医学网      2010年12月29日 11:38:12 Wednesday  
 
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作者:沈瑞莲 张国镜 金 洁 王 伟 邢安凤 周秀艳    作者单位:(首都医科大学燕京医学院 101300)

【摘要】  前列腺素合成酶是人体内重要的酶系,对其的研究目的旨在为临床医学、病理学提供形态学参考依据。

【关键词】  前列腺素合成酶; 分布; 平均灰度值

 前列腺素合成酶是与膜结合的多酶体系,催化、氧化、环化、还原作用一系列反应,前列腺素是由花生四烯酸衍生而成的。在组织切片上显示前列腺素合成酶的原理是该酶可催化底物花生四烯酸氧化成前列腺素,反应中所形成的活泼氧原子又使3.3-二氨基联苯胶形成棕色沉淀,以间接证实前列腺素合成酶的存在。

  1 材料与方法

  正常Wistar大鼠和昆明小鼠,体重分别为200g和20g左右,取其胃和肾,冰冻切片。用Janszen显示法。花生四烯酸0.4mg,DAB 2mg, KCN 0.65mg,0.2MTrisHCI缓冲液(pH8.0 ) 10ml,35℃孵育3小时,孵育后标本用蒸馏水洗,分别用甘油明胶和中性树胶封片。经LeicaQ50 OMC图像分析仪进行平均灰度值( Mean.Crey.MG)的测定,用于进行酶组织化学反应强度分析。

  2 结果

  前列腺素合成酶反应产物为棕色颗粒,在大、小鼠的反应部位基本相同。在小鼠肾脏,肾皮质深层靠近髓质阳性反应产物,主要以近端小管曲部为主。在小鼠胃黏膜的近黏膜下层有阳性反应产物。在大鼠肾和胃也获相同结果。经图像分析仪测量每种组织切片5张,共测50视野。每种组织在不同封固条件下各测定一张盖玻片下无切片,但有封固剂的区域为空白对照。按肾、胃的顺序,而以明胶在前,树胶在后的排序测量,所获平均灰度值如下:小鼠222.91±9236.33±18.14209.42±7.50227.96±13.36大鼠217.42±6.0622701±11231.11±12.87225.83±10.15

  3 讨论

  通过对大、小鼠肾脏前列腺素合成酶组织化学反应的观察发现,阳性反应的部位基本相同,均位于皮质深层三分之二区域,而皮质浅层三分之一处基本无反应。说明在大、小鼠,前列腺合成酶在作用于花生四烯酸,合成前列腺素并无明显差别。肾正常血流量的维持及调节有赖于前列腺素的产生。由于前列腺素有明显的舒张血管的作用,在肾内使肾血管扩张增加肾血流量及肾血流的重新分布起到降压和调节动脉压的作用。在某些病理情况下,缺乏前列腺素一方面可导致血管收缩和高血压,另一方面肾内前列腺素缺乏可引起肾皮质血流减少,于是引起肾素释放使肾素血管紧张素系流被激活,促使血压升高而肾皮质本身具有较强的合成前列腺素的功能[1],也从侧面加以印证。

  在胃黏膜近黏膜下层的较大区域中,前列腺素合成酶的组织化学反应较强,说明前列腺素的功能较强,这与抑制胃蒙古膜壁细胞分泌胃酸过多维持胃液整体平衡有密切关系,在胃液分泌的负反馈调节机制中起重要作用。至于抑制机理可能是作用于腺甘酸环化酶系统,阻止:cAMP的生成,而cAMP被认为是促进胃酸分泌的媒介。

  从分布部位看,前列腺素合成酶的酶组织化学反应强度的差异并不十分明显。平均灰度值差异很小。另外,从前列腺素的分布来看,酶组织化学反应的结果与生物化学理论并不完全相符。由本实验观察可知,前列腺素合成酶的阳性反应部位是在肾皮质深层的区域,主要在近曲小管;而生物化学理论所描述的是在肾髓质,主要在肾集合小管细胞、肾动脉内皮细胞、及肾间质细胞内合成。由于肾血流量大、血流速度快且肾皮质的血流量要远远大于肾髓质的特点,前列腺素合成酶活性较强的部位是在肾皮质,但其并不一定是前列腺素发挥作用较强的区域。很有可能此酶在肾皮质合成以后随血液循环被运输到肾髓质而发挥其生物学活性。前列腺素除对肾脏和胃的作用外,对水电解平衡、血小板、生殖系统[2]、心血管系统以及神经系统均有调节作用。本研究的目的仅在于为上述功能的调节及该没在临床的应用提供形态学参考依据。

【参考文献】
   1 姚泰,罗自强.生理学.北京:人民卫生出版社, 2001,232.

  2 王边海,金惠铭.病理生理学.北京人民卫生出版社,1994,725.

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