您所在位置: 首页 > 期刊 > 过刊浏览 > 内科学> 《中国老年学杂志》> 2012年11月31卷22期>文章> 文章详情

老年代谢综合征患者趾臂指数与Th17细胞及相关细胞因子的相关性

首席医学网      2012年07月22日 13:25:04 Sunday  
 
  加入收藏夹   官方投稿信息

作者:刘振东1 董元丽2 路方红1 赵颖馨1 孙尚文1 王舒健1 王 琳     作者单位:1 山东省医学科学院基础医学研究所 2 临沂市兰山区第一人民医院(华中科技大学同济医学院附属同济医院,湖北 武汉 430030)

【摘要】  目的 探讨老年代谢综合征患者趾臂指数(TBI)与Th17细胞及其与细胞因子白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的相关性。方法 依据2004年中国糖尿病学会(CDS)提出的标准入选161例代谢综合征患者,应用全自动动脉硬化测定仪VP-1000测定患者的TGBI,将患者分为TBI正常组和TBI降低组。采用流式细胞检测技术检测患者外周血中Th17细胞水平,并采用ELISA法检测所有高血压患者的血清IL-17、IL-6及TNF-α浓度水平。结果 TBI降低组外周血Th17细胞比例明显高于TBI正常组(t=7.116,P<0.01)。TBI降低组Th17细胞因子IL-17、IL-6及TNF-α血清浓度较TBI正常组显著升高(P<0.01)。相关及回归分析显示,TBI与外周血Th17细胞比例、血清IL-17、IL-6及TNF-α血清浓度水平呈负相关(r=-0.443、-0.485、-0.348及-0.429,均P<0.001), Th17细胞比例、IL-17、IL-6、TNF-α血清浓度水平是影响baPWV的主要因素。结论 老年代谢综合征患者TBI与Th17细胞及其细胞因子相关。

【关键词】  代谢综合征;趾臂指数;炎症;Th17细胞;细胞因子

  【Abstract】 Objective To investigate the correlations between toe brachial index (TBI) and Th17 cells and Th17-associated cytokines in old metabolic syndrome patients. Methods According to the standard of metabolic syndrome presented by Chinese Diabetes Society in 2004, 161 metabolic syndrome patients were eligible recruited. TBI was observed using VP-1000 automatic atherosclerosis analyzer, and then the patients were divided into normal TBI group and lower TBI group, respectively. Frequencies of peripheral blood Th17 cells were detected using flow cytometry. And ELISA was used to test serum IL-17, IL-6 and TNF-α. Results The frequency of peripheral blood Th17 cells in lower TBI group was higher than that in normal TBI group (t= 7.116,P< 0.01). Levels of serum IL-17, IL-6 and TNF-α in lower TBI group were elevated than those in normal TBI group (P<0.01). Th17 cells frequency, IL-17, IL-6 and TNF-α were negatively correlated with TBI (r=-0.443, -0.485, -0.348 and -0.429, P< 0.001). Multiple linear regression analysis showed that Th17 cells frequency, IL-17, IL-6 and TNF-α were risk factors of TBI. Conclusions TBI is associated with Th17 cells and Th17-associated cytokines in old metabolic syndrome patients.

  【Key words】 Metabolic syndrome; Toe brachial index; Inflammation; Th17 cell; Cytokines

  Th17细胞是最近发现的一类新的、具有与Th1及Th2不同的独立分化途径的、能特异性产生白介素(IL)-17的CD4+效应T细胞,IL-17、IL-6及TNF-α是其独特的相关效应细胞因子。Th17细胞在自身免疫性疾病和炎症性疾病中发挥重要调节作用〔1〕。周围动脉硬化是全身血管系统性动脉粥样硬化的窗口标志,被视为冠心病的等危症。趾臂指数(TBI)是脚拇趾部收缩压与前臂收缩压的比值。研究表明,TBI是周围动脉病变(PAD)足趾部小血管病变的指标,能精确反映主动脉与足趾间动脉硬化情况〔2,3〕。目前,关于Th17细胞与动脉粥样硬化关系的研究较少。本研究旨在探讨老年代谢综合征患者TBI与Th17细胞及其相关细胞因子之间的相关性。

  1 资料与方法

  1.1 一般资料

  所有161例代谢综合征患者,均选自2009年11月至2011年3月来我中心拟接受治疗的患者,年龄60~90〔平均(69.28±8.64)〕岁,其中男85例,女76例。入选的代谢综合征患者均未接受过系统治疗,服用药物为利尿剂、钙离子拮抗剂、血管紧张素转换酶抑制剂、他汀类药物、复合制剂或中药制剂。有以下情况之一者被排除:继发性高血压、高血压急症、心脏瓣膜病、结缔组织疾病、急及慢性炎症、近期使用影响免疫反应药物者、肿瘤患者、妊娠者和其他严重的疾病患者。所有受试者均已知情同意书。

  1.2 代谢综合征标准

  依据2004年中国糖尿病学会(CDS)提出的代谢综合征标准〔4〕,符合以下4个组成成分中的3个或全部者为代谢综合征患者:①超重或肥胖:体重指数(BMI)≥25.0 kg/m2。②高血糖:空腹血糖(FPG)≥110 mg/dl(6.1 mmol/L)及(或)糖负荷2 h血糖≥140 mg/dl(7.8 mmol/L);及(或)已确诊为糖尿病并治疗者。③高血压:收缩压(SBP)/舒张压(DBP)≥140/90 mmHg,及(或)已确诊为高血压并治疗者。④血脂紊乱:空腹血甘油三酯(TG)≥150 mg/dl(1.70 mmol/L);及(或)空腹血高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C):男性≤35 mg/dl(0.9 mmol/L),女性≤39 mg/dl(1.0 mmol/L)。

  1.3 TBI测定及患者分组

  应用日本Colin公司生产的全自动动脉硬化测定仪VP-1000在25℃左右的室温下测定,仪器自动计算得到TBI,取左右两侧TBI的低值作为该患者TBI进行统计学分析。入选者如果一侧TBI < 0.6,即认为TBI降低〔5〕。根据TBI测定结果,患者被分为两组:TBI≥0.6为TBI正常组,TBI<0.6为TBI降低组。

  1.4 外周血中Th17细胞的检测〔6,7〕

  受试者禁食12 h,于次日晨采肘静脉血5 ml,肝素抗凝。Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC)。RPMI-1640(美国Gibco公司)调整细胞浓度至2×106/ml,接种到24孔板后加入佛波酯(50 μg/L)、离子霉素(1 μmol/L)和莫能霉素(500 μg/L),37℃ 5% CO2细胞培养箱培养4 h,以上所有的试剂均购自美国Sigma公司。收集细胞,根据计数等分为测定管和同型对照管,加入20 μl PE标记的鼠抗人CE4单抗,4℃避光孵育30 min。PBS洗涤2次,固定液室温避光固定反应20 min后离心弃去上清,PBS洗涤2次。加入破膜剂进行细胞打孔利于细胞因子染色,离心弃去上清后予细胞因子染色。测定管加入FITC标记的IL-17A 0.5 μg,对照管加入同型对照,4℃避光孵育30 min。上述标记的抗体均购自eBioscience公司。应用流式细胞仪FAC-SAria型,根据前向散射光和侧向散射光以淋巴细胞群设门,设置各通道之间的荧光裣之后,再对Th17细胞的比例进行检测。

  1.5 Th17细胞相关效应因子及血液生化指标测定

  用ELISA试剂盒分别检测血清Th17细胞相关细胞因子IL-17、IL-6及TNF-α的表达水平。人IL-17、IL-6及TNF-α ELISA试剂盒均购自Bender MedSystems公司。操作过程按产品说明进行,实验中设置空白对照和阴性对照,以保证检测结果的可靠性。IL-17、IL-6及TNF-α的灵敏度分别为0.5 pg/ml、1.0 pg/ml及<4.0 pg/ml。应用日立7060全自动生化分析仪进行空腹血糖、总胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白等生化指标检测。

  1.6 统计学处理

  应用SPSS16.0 软件进行资料统计分析,计量资料以x±s表示,计数资料用百分数表示。组间两两比较采用LSD检验,计数资料用卡方检验,两因素相关性采用Pearson相关分析,多因素分析采用多元线性逐步回归。以P<0.05为差异有统计学意义。

  2 结 果

  2.1 两组代谢综合征患者一般资料比较

  两组患者的年龄、BMI、SBP、DBP、总胆固醇(TC)、TG、吸烟史、饮酒史比较,无统计学意义(P>0.05)。TBI降低组HDL-C明显低于TBI正常组(t=5.032,P<0.01),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及FPG明显高于TBI正常组(t分别=2.575及3.060,P分别=0.011及0.003)。表1。表1 两组代谢综合征患者一般资料比较

  2.2 两组代谢综合征患者外周血Th17细胞及其细胞因子血清浓度水平比较

  TBI降低组外周血Th17细胞比例为(0.56±0.17)%,明显高于TBI正常组(0.38±0.17)%,比较有统计学意义(t=7.116,P<0.01)。TBI降低组Th17细胞因子IL-17、IL-6及TNF-α血清浓度分别为(18.01±6.72) pg/ml、(29.14±11.93) pg/ml及(58.65±20.42) pg/ml,较TBI正常组显著升高〔(11.91±6.80)、(19.88±8.49)、(40.48±21.37) pg/ml〕(P<0.01)。

  2.3 代谢综合征患者TBI与Th17细胞及其细胞因子血清浓度水平相关性分析

  Pearson相关分析显示,TBI与代谢综合征患者外周血Th17细胞比例、血清IL-17、IL-6及TNF-α血清浓度水平呈负相关(r=-0.443,-0.485,-0.348,-0.429,P<0.001)。

  2.4 代谢综合征患者TBI与Th17细胞及其细胞因子血清浓度水平多元线性逐步回归分析

  以TBI为因变量,性别、年龄、BMI、SBP、DBP、TG、TC、HDL-C、LDL-C、FPG及Th17细胞、IL-17、IL-6、TNF-α血清浓度水平为自变量进行多元线性回归分析,结果显示,Th17细胞比例、IL-17、IL-6、TNF-α血清浓度水平是影响TBI的主要因素。表2。表2 代谢综合征患者Th17细胞及其相关细胞因子血清浓度水平与TBI多元线性回归分析

  3 讨 论

  代谢综合征是心血管多种危险因素在个体内集结的状态,是一组与发生动脉粥样硬化性心血管疾病危险相关的临床特征。研究表明,炎症反应贯穿于动脉粥样硬化发生发展的始终,而T淋巴细胞及其分泌的细胞因子发挥着重要作用〔8,9〕。

  Th17细胞是新近发现的一群不同于Th1及Th2细胞的重要的介导炎症反应的细胞,是机体存在的一种新型的CD4+效应细胞,具有独立的分化和调节机制,分泌的特征性效应细胞因子除IL-17外,还有IL-6、TNF-α、IL-21、IL-22等,在介导炎症反应、自身免疫病、肿瘤和移植排斥等的发生和发展中具有重要的意义。研究发现,Th17细胞可加重apoE-knockout小鼠模型的动脉粥样硬化〔10,11〕。Th17细胞还可以促进血管紧张素Ⅱ诱导的动脉粥样硬化〔12〕。对Th17细胞功能与急性冠状动脉综合征相关性进行研究〔13,14〕,发现不稳定心绞痛、急性心肌梗死患者循环中Th17细胞数较健康对照者显著增加,Th17细胞相关细胞因子和转录因子(RORγt)水平也显著升高。Eid等〔15〕研究发现,多克隆刺激粥样硬化的冠脉中浸润的T细胞,可产生高水平的IL-17,并呈时间依赖性,而无明显粥样硬化病变的冠脉产生很少IL-17。本研究结果显示,TBI降低组外周血Th17细胞比例明显高于TBI正常组,并且Th17细胞因子IL-17、IL-6及TNF-α血清浓度均较TBI正常组显著升高。TBI与代谢综合征患者外周血Th17细胞比例、血清IL-17、IL-6及TNF-α血清浓度水平呈负相关。Th17细胞比例、IL-17、IL-6、TNF-α血清浓度水平是影响TBI的主要因素。表明Th17细胞在动脉粥样硬化的发生发展中可能起着重要作用。

  Th17细胞的发现弥补了Th1/Th2介导免疫效应机制的不足,丰富了T细胞亚群的种类,增进了人们对T淋巴细胞的进一步了解。尽管目前只有少数关于Th17细胞与心血管疾病的研究,但Th17细胞功能在动脉粥样硬化整个复杂免疫反应过程中的变化,反映了Th17细胞可能是动脉粥样硬化发生发展过程中不可或缺的一个重要因素。

【参考文献】
    1 Dong C.Genetic controls of Th17 cell differentiation and plasticity〔J〕. Exp Mol Med,2011;43(1):1-6.

  2 侯佳宁,徐 敏,黄 韵,等.2型糖尿病患者趾臂指数(TBI)与动脉粥样硬化的相关性研究〔J〕.中华内分泌代谢杂志,2010;26(3):195-8.

  3 Hirsch AT,Haskal ZJ,Hertzer NR,et al.ACC/AHA 2005 guidelines for the management of patients with peripheral arterial disease (lower extremity,renal,mesenteric,and abdominal aortic):executive summary〔J〕.J Am Coll Cardiol,2006;47(6):1239-312.

  4 中华医学会糖尿病学分会代谢综合征研究协作组.中华医学会糖尿病学分会关于代谢综合征的建议〔J〕.中华糖尿病杂志,2004;12(3):156-61.

  5 Orchard TJ,Strandness Jr DE.Assessment of peripheral vascular disease in diabetes.Report and recommendations of an international workshop sponsored by the American Diabetes Association and the American Heart Association September 18-20,1992 New Orleans,Louisiana〔J〕. Circulation,1993;88(1):819-28.

  6 Zhang J,Hua G,Zhang X,et al.Regulatory T cells/T-helper cell 17 functional imbalance in uraemic patients on maintenance haemodialysis:a pivotal link between microinflammation and adverse cardiovascular events〔J〕.Nephrologh (Cariton),2010;15(1):33-41.

  7 Cheng X,Yu X,Ding YJ,et al.The Th17/Treg imbalance in patients with acute coronary syndrome〔J〕.Clin Immunol,2008;127(1):89-97.

  8 罗 义.亚临床炎症与代谢综合征〔J〕.新医学,2009;40(5):337-50.

  9 Libby P,Ridker PM,Maseri A.Inflammation and atherosclerosis〔J〕. Circulation,2002;105(9):1135-43.

  10 Pejnovic N,Vratinos A,Lee SH,et al.Increased atherosclerotic lesions and Th17 in interleukin-18 deficient apolipoprotein E-knockout mice fed high-fat diet〔J〕.Mol Immunol,2009;47(1):37-45.

  11 Erbel C,Chen L,Bea F,et al.Inhibition of IL-17A attenuates atherosclerotic lesion development in ApoE-deficient mice〔J〕.J Immunol,2009;183(12):8167-75.

  12 Liu XH,Ji QW,Huang Y,et al.Th17 response promotes angiotensinⅡ-induced atherosclerosis〔J〕.Med Hypotheses,2011;76(4):593-5.

  13 王 怡,李 庆,陈 坷,等.急性冠状动脉综合征患者外周Th17细胞水平检测及临床意义〔J〕.安徽医科大学学报,2010;45(4):522-5.

  14 余 娴,程 翔,廖玉华,等.急性冠状动脉综合征患者Th17细胞检测及意义〔J〕.临床心血管病杂志,2008;24(2):45-8.

  15 Eid RE,Rao DA,Zhou J,et al.Interleukin-17 and interferon-γ are produced concomitantly by human coronary artery-infiltrating T Cells and act synergistically on vascular smooth muscle cells 〔J〕.Circulation,2009;119(10):1424-32.

  (编辑 曹梦园)

  订阅登记:

请您在下面输入常用的Email地址、职业以便我们定期通过邮箱发送给您最新的相关医学信息,感谢您浏览首席医学网!

邮箱:    专业:    职称:      

医学期刊医学会议医学专区医学护理